先前用α----酮-测试的单位点突变体没有裂解 (±) -或 ----酮和的c-c 键。转向三重tkgst突变体---（hlhxdx 或 lx，或 fx，或 lx 或 lx），将先前确定的位置结合起来进行逆向反应（使用脂肪族酮酸作为供体和脂肪醛作为受体形成α----酮）。在大肠bl菌株中表达---，使用粗提物针对α----酮和进行筛选，并与型tkgst进行比较。根据产物或的斑点强度，通过薄层色谱法(tlc)估计每个---中的阳性百分比。
先前的结果表明，双变体hlhs是提高对酸类似物（包括氧代---）的底物亲和力的突变体。较小且极性较小的侧链代替两个组氨酸的存在允许扩大较大疏水供体底物的活性位点并保持催化机制完整。将这两个位置与asp、leu、phe或 leu上的突变连续组合。此外选择l位，它参与稳定 thdp 的唑循环，并且还可以通过与比 leu 更长的碳链残基相互作用来稳定脂肪族底物。创建了五个---，hlhxdx（或 lx、或 fx 或 lx 或 lx）（表 ）。
图片来源：chem. sci.）通过延长反应时间并增大氢气压力可以使该反应完全转化，但在剧烈条件下未产生过度还原产物（二醇）。经过条件优化， irganox612价格---，确定了反应条件：在叔---钠存在下，利用irf-ampha络合物（.％负载量）催化体系在中可以将对称，-二酮还原得到相应的手性---酮（ee ， dr :），并且产物中未发现二醇。此外，该反应的催化常数可以达到，而无明显的立体选择性降低。
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