随后基于这些结果,研究了tk反应的可逆性(模拟逆偶环缩合),用于用适当的 tkgst 变体裂解脂肪族 α----酮(方案 b)。构建tkgst突变体库在戊糖磷酸途径中,磷酸化醛糖 (c-c)和酮糖 (c-c) 分别是tk的受体和供体底物。为了提高tkgst对非磷酸化α----酮- 的活性(表),根据通过位点饱和诱变 (ssm) 进行的半合理诱变在目标位置修改了tkgst活性位点。tksce、tkec和来自的tk (tkban) 等微生物tk的d结构具有很强的蛋白质序列同源性。稳定tk 底物的关键残基是相同的,并且与thdp具有相似的方向。
克级制备及α----酮衍生物应用转化总结宋秋玲课题组发展了硼酸作为亲核试剂参与在passerini反应中的方法,该反应实现简化了醛、异合物和硼酸对α----酮骨架的模块化接入。通过该三组分反应,体现出的---团兼容性支持了生物活性分子和分子的后期修饰的多样化,同时对获得的α----酮进行的大量后续转化反应,进一步说明了该方法的实用性。该研究成果近期发表在nat. commun.上,通讯为福州大学宋秋玲,为福州大学杨凯博士,硕士研究生张峰、方通昌、李朝堃、李等做了重要贡献。
结果没有观察到产物的tkgst突变体---的形成,但观察到具有几种tkgst突变体裂解物(si) 的产物。---hlhslx 提供了多数量的活性tkgst突变体。基于这些结果,对个命中进行了测序, 大分子光引发剂8028如何,其中个显示ile代替了leu。ile---了一个新的thdp位置,有利于与hl的相互作用(图)。 为了进一步改进,创建另一个库,保留li和hl,并通过ssm在h位置上创建多样性,希望用非极性残基代替ser。
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